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細胞培養(yǎng)箱的清潔和消毒

更新時間:2015-03-26點擊次數(shù):6180

1.   培養(yǎng)箱消毒:先用純水擦洗,再用95的酒精擦洗,再照紫外就可以拉!注意周圍環(huán)境的清潔就不會那么容易污染的拉!


2.   我的經驗是在補充水時把水加熱一下,達到培養(yǎng)箱的溫度。


3.   這么早就養(yǎng)細胞了,我們這里一般是用70%的乙醇擦洗,然后再用0.1%的新潔爾滅擦洗,不放心的話再用高錳酸鉀加甲醛1:1比例熏一遍。注意要是熏的話千萬注意混合之后馬上離開,然后密閉細胞培養(yǎng)室,味道很刺激的。在養(yǎng)細胞前消毒,否則,確實沒地方放細胞。


4.   我們的方法比較簡單,先用75%酒精擦拭內壁,通風10分鐘,紫外線照射30分鐘即可。


5.   我們的通常處理是先用75%的酒精擦拭內壁,然后用甲醛+高錳酸鉀熏蒸一個晚上,然后通風一整天(同時打開紫外線照射)。


6.   我們是把培養(yǎng)箱里的板層拿出來高壓一下,箱壁用75%酒精擦一遍,換用詩樂氏擦一遍,再紫外照一夜,效果很好,其他的請高手指教。


7.   熏蒸后吹一天是不夠的,zui起碼要一個星期才可以讓甲醛散盡,要不細胞長不好的


8.   有的培養(yǎng)箱能加熱內壁到90度,也有的帶有紫外線功能。常規(guī)應該每周用酒精擦洗內部一次。具體的操作請參考培養(yǎng)箱的手冊,或著咨詢培養(yǎng)箱。使用消毒劑應小心,培養(yǎng)箱內有檢測溫度、濕度和二氧化碳濃度的傳感器,腐蝕性消毒劑或有機溶劑有可能損壞某些器件,請慎用。另外,揮發(fā)性的甲醛有毒,易燃、易爆。如果在培養(yǎng)箱內殘留甲醛的話,細胞會死光光哦(我實驗室的真實故事)??傊?,先看培養(yǎng)箱手冊,再,方可*啊。


9.   常規(guī)什么也不放!硫酸銅的作用是抑制細菌生長(但多數(shù)用在處理污染的孔板)。因為現(xiàn)在的孵箱都有抑菌功能。


10.   我們實驗室的做法:把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺內加入適量的滅菌雙蒸水或者生理鹽水.再加少量新潔爾滅,濃度沒關系.細胞養(yǎng)的都可以.


11.   我建議

1 先把培養(yǎng)箱*消毒.具體方法也是用75%的酒精好好清洗培養(yǎng)箱.

2,操作時嚴格按照無菌操作的原則

3 我認為雙抗的更換問題倒是不大,除非你正在使用的是污染的抗生素.

4 盡量減少觀看細胞的次數(shù)及時間.


12.   我們實驗室清潔培養(yǎng)箱的方法:用洗衣粉或洗潔精洗一遍——清水沖凈——84消毒液洗——清水沖凈——75%酒精擦洗一遍


13.   這是我們實驗室常規(guī)的培養(yǎng)箱消毒方法(一般一個月一次),希望對你會有用


14.   首先把培養(yǎng)箱里的東西全部取出,放盡培養(yǎng)箱里的三蒸水;反復用三蒸水沖洗培養(yǎng)箱,然后用75%酒精擦3遍,之后再用三蒸水擦3遍;培養(yǎng)箱里的架子先用自來水反復沖洗,然后用蒸餾水、三蒸水、75%酒精各擦3次,于紫外下照射消毒1 h左右;zui后將三蒸水(里面應加少許染料)加入培養(yǎng)箱,將消毒好的架子放入即


15.   培養(yǎng)箱應放置無菌室,水中應加適量的疊氮鈉(防腐)或者硫酸銅,注意空氣消毒.


16.   消毒培養(yǎng)箱的常用方法有兩種:

把細胞移出,記住擰緊瓶蓋,通常放在超凈臺內,室溫一兩個小時,問題不大。如培養(yǎng)室有空調,也可將空調打開。然后先用75%酒精棉球擦拭培養(yǎng)箱內壁,注意不要漏掉任何一個角落。擦拭兩遍后用一蒸水或二蒸水清洗內壁,可多清洗幾遍。zui后用消過毒的棉球或75%酒精棉球把內壁再擦拭一遍即可。整個操作沒有必要在無菌條件下。zui后可在培養(yǎng)箱的水里加上亞甲基藍,混勻即可。亞甲基藍溶液可起到一定的抑菌殺菌作用。待培養(yǎng)箱內酒精幾乎揮發(fā)完時,將細胞放入培養(yǎng)箱中。

還有一種辦法就是直接用蒸餾水清洗完,然后再用紫外燈照(是那種培養(yǎng)箱里就帶有紫外燈的,就方便多了。)

通常培養(yǎng)箱是需要定期清洗的,我們室是1-2月清洗一次,當然這要根據細胞養(yǎng)的多少和培養(yǎng)箱使用的頻繁程度來決定的。


17.   我們實驗室液發(fā)生過類似事件,我把我們處理過程告訴你,希望對你有幫助:

首先消毒培養(yǎng)箱,如果你們有兩個或以上培養(yǎng)箱就好辦了,如果只有一個且還有很多其他細胞就麻煩點。只能暫時的放在超凈臺上。具體如下,中午將空調溫度打到zui高(也只有31度),超凈臺開紫外。下午早點來關紫外,將細胞培養(yǎng)瓶蓋蓋緊,轉到超凈臺內,用75%酒精擦洗培養(yǎng)箱,再用無臭氧型可移動的紫外等照射半小時,然后將細胞放回,松開蓋口即可(切記CO2瓶子閥門要關緊啊,不然氣全跑光了)。

一般實驗室長了霉菌的話,肯定要全部消毒。

再消毒實驗室,先把室內空調和消毒柜過濾網都拆下清洗,在錐形瓶內加點高錳酸鉀,放在實驗室地上,然后倒入甲醛,立馬關門走人就可以了。

2天后再開門裝好東西,和往常一樣開始工作了。由于2天不能做事,個人細胞要先計劃好,大家都可以休息兩天。


18.   我們實驗室是將細胞全部取出,酒精擦洗培養(yǎng)相,然后用紫外線照射4小時以上,污染細胞全部丟掉。還有就是培養(yǎng)室也采用紫外線消毒


19.   我也碰過這個情況,是自己的基礎培養(yǎng)基污染了,光鏡下面可以看見瓶底有細細的黑色小顆粒,但具體原因不詳。處理方法:

1、被污染的細胞全部照過紫外線2小時以上后扔掉;

2、同一批的培養(yǎng)基、使用的細胞清洗液等等全部重新濾過消毒(有點舍不得全部扔掉,就嘗試了一下,結果證明是可以的);

3、打開培養(yǎng)箱,用75%酒精擦洗,然后用新潔爾滅擦洗(此步驟我們重復了2次,隔天),用紫外照射4小時以上;

4、清掃培養(yǎng)室,紫外照4小時以上,重復一次;

后來就沒有啦。:)如果污染嚴重的話,那就要重復重復再重復了。


20.   偶也在年前遇到兩次大爆發(fā),先是真菌后是細菌。搞得我對細胞培養(yǎng)都快失去信心了,我養(yǎng)細胞都一年半了,平時細胞沒什么,感覺養(yǎng)細胞是很簡單的事,可是當污染大爆發(fā)時真的有招架不住的感覺。記得當時丟掉了幾乎所有的細胞,近一百瓶,就只剩下保種的三兩瓶,寒?。?!至于處理方法,也就是乳酸熏蒸(記得把培養(yǎng)箱及超凈臺打開)之后一周關門關窗,不再進培養(yǎng)室,一周后75%酒精做*滅菌,也就是用酒精搽培養(yǎng)箱及培養(yǎng)室里的所有平面,甚至包括地面。到現(xiàn)在有四個月了,偶的細胞一直很好。建議不要驚慌,所謂兵來將擋,水來土掩。呵呵呵,一切會好起來的。


21.   看來你要大動干戈了。首先考慮培養(yǎng)基的問題??梢詥为毞胖靡黄颗囵B(yǎng)基到其他的培養(yǎng)箱里培養(yǎng)24小時看看是不是培養(yǎng)基污染。不過建議還是全部扔掉重新配置比較好。其次考慮培養(yǎng)箱和培養(yǎng)室的問題?;旧蠎撁恳粋€月將培養(yǎng)箱*消毒一次的。首先用75%酒精擦洗,一般的培養(yǎng)箱都是可以拆卸的,將能拆卸的部分拆開擦洗后放到烤箱里烘烤(180度5個小時)。剩下的培養(yǎng)箱里用戊二醛擦洗后用紫外燈反復照射。然后在要用培養(yǎng)箱培養(yǎng)室之前再用紫外燈照射消毒2小時。你的照片里顯示的應該是細菌污染,咳比較好對付。


22.   設置5%,卻顯示5.1%(當然這點差距實在不算太大,至于顯示HIGH CO2,那是可以自己設定的,你可以自己設定二氧化碳濃度達到多少時報警(也即顯示HIGH CO2,同時可能發(fā)出警鳴音,如果你沒有按MUTE按鈕或同等設置),同樣地,你可以設置下限,還有溫度的上下限),培養(yǎng)箱溫度升高時CO2濃度會增加,反之亦然。檢查一下你的CO2減壓閥上面顯示的壓力指示是否超過0.08MPa,長期過高的CO2壓力容易損壞培養(yǎng)箱內CO2壓力調節(jié)模塊,那樣需要很多銀子修理的。如果情況進一步惡化,建議售后服務。


23.   手提式紫外燈


24.   1)一個大原則是:細菌和細胞體系是*不同的,絕不可以放在一起,一般實驗室均設置細菌間、細胞間,嚴格的分開是成功培養(yǎng)細胞的保證。

2)關于CO2培養(yǎng)箱的清潔工作,應該說不難。由于為不銹鋼材,你用0.1%新潔爾滅擦洗干凈后,在用2%的CuSO4清洗(清霉菌,在CO2條件下霉菌很易生/),用70%乙醇噴霧消毒箱內空氣。再涼干后,再底部再加2%CuSO4(水稍出現(xiàn)蘭色即可)的滅菌水進行穩(wěn)定培養(yǎng)箱,待培養(yǎng)箱溫度和濕度穩(wěn)定后,再用一瓶細胞預實驗一下,培養(yǎng)2-3天,沒有問題再進行培養(yǎng)。


25.   有的培養(yǎng)箱可以直接高溫干烤滅菌的,或者有的金屬架可以干烤


26.   底部水盤加入蒸餾水后見到一片一片的東西,很可能是細菌群落的生長!個人經驗是,必須清洗,而且是*清洗干凈!拆開支架和每層的托盤,包括水盤(注意拆卸先向技術員了解內部結構,以防誤拆損壞),用碘伏棉球將培養(yǎng)箱里里外外和拆出來的部件拭擦2次,然后再用酒精將殘留碘伏拭去。下一步是,打開培養(yǎng)箱的門,開紫外照射一晚,這樣就可放心了。我剛回來就是如此弄的,培養(yǎng)的細胞并沒有感染跡象,活力甚佳,供參考!祝你好運!


27.   我使用的方法是:

1 取下培養(yǎng)箱內的隔板及掛鉤,用清水清洗干凈后,75%酒精*擦洗消毒,然后120度烤箱,考1小時。

2,培養(yǎng)箱用清水擦洗干凈后用75%酒精*擦洗消毒

3,帶無菌手套,安裝好培養(yǎng)箱內的隔板及掛鉤

4,打開培養(yǎng)箱紫外燈照射30分鐘

5,高壓蒸餾水后加入

我們一直就是這樣做的,效果很好,可以試試看啊。


28.   補充一個水盤消毒的法子∶清水清洗干凈,75%酒精*擦洗消毒后,多弄些酒精上去,點火燒一下.效果杠杠的?。?/p>


29.   把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺內加入適量的滅菌雙蒸水或者生理鹽水.再加少量新潔爾滅,濃度沒關系


30.   水套式,氣套式二氧化碳培養(yǎng)箱。


31.   細胞生長的環(huán)境要求有一定濕度,必須加水!我的小經驗是: 1、雙蒸水裝在5L瓶中,2、高溫滅菌,3、移進細胞培養(yǎng)實驗室,在紫外照射下冷卻,4、6小時后,在加入培養(yǎng)箱中使用。

如果發(fā)現(xiàn)托盤中的說有白色漂浮物存在是,盡量吸干?。ù宋锟紤]是霉菌污染);

還有如果有條件,就是定期75%酒精大清潔!我一般2個月清潔一次?。ò毎囵B(yǎng)實驗室)

這樣在無菌操作下,基本保證你免除污染!!


32.   培養(yǎng)箱內不加水是不正規(guī)的,因為細胞生長的環(huán)境要求有一定濕度。

我們培養(yǎng)細胞不僅經常保持有水,而且培養(yǎng)液中不加任何抗生素。只要無菌操作過關,不會發(fā)生細菌污染。


33.   我們實驗室平常培養(yǎng)箱的消毒方法:(清潔前開紫外30分鐘)

1、隔板的清潔:先將隔板卸下,用干凈紗布沾新潔而滅擦兩遍;

2、箱內壁用新潔而滅擦拭后再噴75%酒精,關門熏蒸15分鐘;

3、盛蒸餾水的盤子:把盤里的水倒掉,用新潔而滅擦拭,干后倒入三蒸水;

4、裝好板后,再噴75%酒精關門熏蒸30分鐘。

5、培養(yǎng)室開紫外照30分鐘以上。


34.   我們實驗室是將全部隔板卸下,新潔而滅擦拭,放在超凈工作臺內紫外殺菌,CO2孵箱內用紫外燈照射12h以上。


35.   推薦方法:拆卸隔板,新潔兒滅搽3次,然后酒精搽3次,紫外下面照2小時,然后裝上隔板,箱壁同樣處理,打開箱子,用小紫外燈或房間紫外燈照2小時。注意要搽頂部的螺旋槳。裝好后,噴酒精即可。另外,還是用用硫酸銅比較好,飽和溶液放置在箱子底部。屢試屢爽,大約可以管3-4個月沒有問題。如有效,請斑竹加分,謝謝!


36.   加硫酸銅的目的是為了防止真菌的生長,但硫酸銅容易改變孵箱pH值,所以建議不加硫酸銅,直接加蒸餾水即可,保持孵箱濕度.


37.   前一段時間培養(yǎng)箱里老是有散在的細胞霉菌污染。培養(yǎng)箱高溫消毒后,現(xiàn)在打開,發(fā)現(xiàn)里面那扇玻璃門和墊圈會有大量水汽,培養(yǎng)瓶外壁也有。請問是怎么回事?細胞還能養(yǎng)嗎?是因為培養(yǎng)箱門的加熱故障或設置錯誤,導致門的溫度與箱內溫度不一樣,所以引起玻璃門結水汽。對細胞培養(yǎng)沒多大的影響,因為箱內的溫度是正常的。


38.   這種情況很常見,可以用以下方法解決:往水盤里的水加入適量的硫酸銅,攪拌均勻即可,因為硫酸銅是重金屬鹽,可以達到殺菌效果;另外也可以加10%的新吉爾滅等無刺激性的消毒物質。注意,千萬不能直接往水盤里加自來水,因為自來水里有很多潛在的霉菌等,一旦條件溫和它們就會迅速繁殖,是用煮開的蒸餾水。注意了這些細節(jié),問題就迎刃而解了

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